فایل ردیابی هیستوموناس مله اگریدیس در بوقلمون های کشتارشده

توضیحات

فایل ردیابی هیستوموناس مله اگریدیس در بوقلمون های کشتارشده
این پایان نامه در قالب فرمت word قابل ویرایش ، آماده پرینت و ارائه به عنوان پروژه پایانی میباشد
چکیده
به منظور ردیابی هیستوموناس مله اگریدیس در بوقلمون‌های کشتار شده در استان اصفهان، 200 نمونه خون و 200 نمونه کبد در کشتارگاه اخذ شد و پس از استخراج DNA، قطعه 550 جفت بازی مربوط به ژن 18SRNA تکثیر شد. علاوه بر آن، نمونه‌های کبد در فرمالین 10% نگهداری و پس از تهیه مقاطع پاتولوژی رنگ آمیزی با هماتوکسیلین - ائوزین از نظر وجود انگل مورد بررسی قرار گرفت. نتایج PCR نشان داد از 200 نمونه خون، 18 نمونه (9%) و از تعداد 200 نمونه کبد، 32 نمونه (16%) از لحاظ هیستوموناس مله اگریدیس مثبت می‌باشد. نتایج هیستوپاتولوژی نشان داد از بین نمونه‌های PCR مثبت 76/11 % در هیستوپاتولوژی مثبت ارزیابی شدند لذا به نظر می‌رسد برای شناسایی هیستوموناس مله اگریدیس PCR از ویژگی بالایی برخوردار می‌باشد.
کلید واژه‌ها : بوقلمون، هیستوموناس مله اگریدیس، PCR، اصفهان.
فهرست مطالب
عنوان صفحه
چکیده 1
فصل اول «مقدمه و طرح تحقیق»
1-1- مقدمه 3
1-2- بیان مسئله 4
1-3- مروری بر سابقه تحقیق 4
1-4- اهداف، فرضیات و سوالات تحقیق 6
1-4-1- اهداف تحقیق 6
1-4-1-1- هدف کلی 6
1-4-1-2- اهداف جزئی 6
1-4-2- فرضیات تحقیق 6
1-4-3- سئوالات تحقيق 6
1-5- روش تحقیق و پژوهش 7
فصل دوم « کلیات »
انگل‌ها و بیماری‌های طیور و سایر پرندگان 9
2-1- انگلهای خارجی 9
2-1-1- ساسها 9
2-1-2- شپشهای گزنده 9
2-1-3- مگسهای سیاه 10
2-1-4- مایت‌های ماکیان 10
2-1-5- لارومایت ها 10
2-1-6- سوسک بستر و لارو آن آلفیتوبیوس دپاپرینوس 11
2-1-7- مایت‌های پر و مایت‌های ایجادکننده پرریزی 11
2-1-8- مایت‌های زیر پوستی 11
2-2- انگل‌های داخلی 12
2-2-1- کیسه ملتحمه 12
2-2-2- نای 13
2-2-4- پیش معده 14
2-2-5- سنگدان 14
2-2-6- روده باریک 15
2-2-7- روده کور 16
2-2-8- پوست 17
2-3- بیماری‌های انگلی طیور 17
2-3-1- کوکسیدیوز 17
2-3-2- کریپتوسپوریدیوز 20
2-3-3- هگزامیتیازیس 24
2-3-4- هیستومونیازیس 27
2-3-5- لکوسیتوزئونوز 32
2-4- واکنش زنجیر‌های پلی مراز( PCR ) 35
2-4-1- مواد و وسایل لازم برای انجام برای انجام آزمایش PCR 36
2-4-2- سنتز 36
2-4-3- تشخیص و تجزیه فراورده‌های PCR: 37
فصل سوم «مواد و روش کار»
3-1- نمونه گیری 40
3-2- استخراج DNA از کبد با استفاده از کیت 40
3-3- استخراج DNA از خون با استفاده از کیت 41
3-4- آزمایش PCR 42
3-4-1- روش کار 42
3-5- تهيه ژل آگارز 43
3-5-1- مواد و وسايل لازم 43
3-5-2- روش تهيه بافر (1X) TBEبراي تهيه ژل آگارز 44
3-5-3- روش تهيه ژل آگارز 44
3-5-4- روش انجام الکتروفورز 44
3-5-5- آنالیز محصول PCR: 45
3-6- آزمایشات هیستوپاتولوژی 45
3-6-1- رنگ آمیزی هماتوکسیلین-ائوزین (H&E) : 45
3-6-2- روش رنگ آمیزی اسلاید با رنگ (H&E) : 46
3-6-3- تفسیر رنگ آمیزی (H&E) 47
3-6-4- نتایج رنگ آمیزی (H&E) 48
فصل چهارم « نتایج »
4-1- نتایج کیفی مربوط به استخراج DNA 50
4-2- نتایج آزمایشات هیستوپاتولوژی 51
فصل پنجم « بحث و نتیجه گیری »
5-1- بحث 53
5-2- پیشنهادات 56
منابع 57
فهرست شکل‌ها
عنوان صفحه
شکل 4-1- الکتروفورز محصولات PCR به منظور تکثیر ژن انگل هیستومونیازیس در نمونه‌های خون و کبد بوقلمون بر روی ژل آگارز 1%. 50
شکل 4-2- مشاهده مقاطع انگل هیستوموناد در بین هپاتوسیت‌های کبدی. 51
فهرست جداول
عنوان صفحه
جدول 4-1- مقایسه روش ردیابی از طریق PCR و آزمایشات هیستوپاتولوژی 51